服務(wù)流程： 

（1）客戶提供：目的細(xì)胞具體信息；

（2）操作過程：細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，細(xì)胞發(fā)貨；

（3）交付內(nèi)容：細(xì)胞系/細(xì)胞株，以及細(xì)胞使用說明書。

產(chǎn)品名稱	NCI-H551[h551]細(xì)胞
規(guī)格	詳見說明書
貨號(hào)	BH-8010784

培養(yǎng)操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 

4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及細(xì)胞化學(xué)檢測。 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明 ：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃**，并經(jīng)過鉻酸洗液處理； 

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕； 

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 

5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

注意事項(xiàng)：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置數(shù)小時(shí)（4h左右），穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)，切忌在溫箱內(nèi)靜置過夜。

3. 靜置后鏡檢，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)。建議傳代后也拍照記錄細(xì)胞生長情況。

4. 貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，收集細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基，留8ml繼續(xù)培養(yǎng)至80%左右再傳代，瓶蓋可稍微擰松。

5. 細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基含血清和雙抗，可收集后4℃保存?zhèn)溆茫裳a(bǔ)加2%血清。剛開始傳代時(shí)建議一半用細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基，一半用客戶自備的培養(yǎng)基，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件，以免因不適應(yīng)而造成生長狀態(tài)不佳。

6. 細(xì)胞胰酶消化液建議使用PBS配制，

7. 因?yàn)榧?xì)胞培養(yǎng)過程外因太多，所以我們的售后保障期為一周，超過一周的細(xì)胞我們會(huì)酌情處理，但不提供免費(fèi)更換服務(wù)。 細(xì)胞運(yùn)輸和保存：可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存方式：（1）干冰運(yùn)輸，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇；收到后應(yīng)繼續(xù)生長，傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。

大鼠軟骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 磷酸化Ack1抗體

大鼠破骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 磷酸化β抑制蛋白1抗體

大鼠皮膚肥大細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 磷酸化有絲分裂激酶A抗體

大鼠前脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 磷酸化APS抗體

大鼠成骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 有絲分裂激酶A抗體

大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 干擾素誘導(dǎo)蛋白AIM2抗體

大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 水通道蛋白-2抗體

大鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 抑制基因ABI2/精氨酸酪氨酸蛋白激酶結(jié)合蛋白抗體

大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL ADP核糖基化因子樣11抗體

大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX3抗體

大鼠皮下脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX1抗體

大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX2抗體

大鼠表皮黑色素細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 自噬相關(guān)蛋白10抗體

大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL ?；o酶A結(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體

大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 氨基?；?抗體

大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 脂肪甘油三酯脂酶抗體

大鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體

大鼠腦膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 雙調(diào)蛋白（結(jié)腸直腸細(xì)胞源性生長因子）抗體

大鼠神經(jīng)元細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 磷酸化水通道蛋白2抗體

大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 粘附相關(guān)激酶抗體

大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 磷酸化粘附相關(guān)激酶抗體

大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 磷酸化蛋白激酶B抗體

大鼠腦成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 磷酸化水通道蛋白2抗體

大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體

大鼠雪旺氏細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 磷酸化蛋白激酶B抗體

大鼠小腦顆粒細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體

大鼠嗅鞘細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體

大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 磷酸化雄體抗體

大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 磷酸化雄受體抗體

大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗體

大鼠視網(wǎng)膜muller細(xì)胞 100mL 磷酸化蛋白激酶B抗體

大鼠虹膜色素上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體

大鼠晶狀體上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 凋亡相關(guān)蛋白3抗體

大鼠角膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 自噬相關(guān)蛋白18抗體

大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 自噬相關(guān)蛋白4A抗體

大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 載脂蛋白A4抗體

大鼠角膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 12脂氧合酶抗體

大鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 血管緊張素III抗體

大鼠牙**細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 腺苷酸環(huán)化酶3抗體

小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 血管動(dòng)蛋白抗體

小鼠肺血管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 腺病毒早期E1A蛋白抗體

小鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體

小鼠氣管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體

小鼠氣管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體

小鼠肺成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體

小鼠支氣管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 胞質(zhì)乙醛脫氫酶1抗體

小鼠支氣管成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL ADP核糖基化樣因子ARL3抗體

小鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 花生四烯酸15脂氧合酶1抗體

小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 乳腺癌增強(qiáng)蛋白2抗體

NCI-H551[h551]細(xì)胞小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL α1微球蛋白抗體

小鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體

小鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 腺苷A2b受體/神經(jīng)生長因子1受體抗體

小鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL AMPK的相關(guān)蛋白激酶5抗體

小鼠胰島細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 致瘤磷蛋白32相關(guān)蛋白1抗體

小鼠胰腺星狀細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 腺苷脫氨酶抗體

小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族4抗體

操作流程：

1、您收到母細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作：

取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)，然后換用新鮮完全培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。

2、細(xì)胞傳代：

1）細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；

2）添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；

3）棄上清，沉淀細(xì)胞用12ml完全培養(yǎng)基重懸，然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代，*后放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

4）待細(xì)胞完全貼壁后，觀察培養(yǎng)結(jié)果，之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。

3、細(xì)胞凍存：

1）細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；

2）添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；

3）用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；

4）先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。 

4、細(xì)胞復(fù)蘇：

1）從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具），快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；

2）將凍存管中的細(xì)胞移至含5ml完全培養(yǎng)基的15ml離心管中， 1000rpm離心5min；

3）棄上清，沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸，接種25cm2培養(yǎng)瓶，于37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

4）換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。