細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃**，并經(jīng)過鉻酸洗液處理； 

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕； 

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 

5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA Kit　Culling等PB-KOH-PAS法粘多糖染色試劑盒

RKO細(xì)胞株　大鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA Kit

pKAR1/Pur(pKAR1Pur)　Desulfuromonas thiophila medium

聚蔗糖400　pBeloBAC11

超細(xì)PCR檢測(cè)試劑盒　人胃蛋白酶原A(PG-A)ELISA Kit

pYES2/CT(pYES2CT)　柱式石蠟包埋組織DNAout2.0（二代測(cè)序?qū)Ｓ茫?

L3467　pMCSG53 (linearized)

人抗肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)ELISA Kit　酸鐵銨溶液，4%

BT-549細(xì)胞株　豬腦心肌炎病毒RT-PCR檢測(cè)試劑盒

pGL4.16[luc2CP Hygro]　Aciduliprofundum medium

豬透明質(zhì)酸(HA)ELISA Kit　pAMP10

CTP溶液，2.5 mM（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）　人嗜酸白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員12(EAR12)ELISA Kit

pVK102　Tca-8113 [Tca8113]細(xì)胞株

大鼠胚胎成纖維細(xì)胞α－苯甘氨酸 英文名稱：Alpha phenylglycine 規(guī)格：：50mg 保存：：-20℃，避光

3－甲基利福霉素SV 英文名稱：3 - methyl rifamycin SV 規(guī)格：：50mg 保存：：-20℃，避光

醌式利福平 英文名稱：Quinone Li Fuping 規(guī)格：：100mg 保存：：-20℃，避光

頭孢哌酮S異構(gòu)體 英文名稱：Cefoperazone S isomers 規(guī)格：：50mg 保存：：-20℃，避光

新霉胺 英文名稱：Neamine 規(guī)格：：80mg 保存：：-20℃，避光

氨芐西林 英文名稱：Ampicillin 規(guī)格：：100mg 保存：：-20℃，避光

阿莫西林 英文名稱：Amoxicillin 規(guī)格：：100mg 保存：：-20℃，避光

頭孢氨芐 英文名稱：Cefalexin 規(guī)格：：200mg 保存：：-20℃，避光

頭孢 英文名稱：Cephalothin 規(guī)格：：150mg 保存：：-20℃，避光

β-多西環(huán)素 英文名稱：Beta doxycycline 規(guī)格：：50mg 保存：：-20℃，避光

4－差向金霉素 英文名稱：4 - ECTC 規(guī)格：：50mg 保存：：-20℃，避光